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鐵死亡研究-細胞亞鐵檢測常見問題解答
發布時間：
2023-05-16
細胞亞鐵含量增多是鐵死亡區別其他細胞死亡方式的一個主要特征，其檢測也是鐵死亡研究最常見的指標之一。根據市場熱點反饋，Elabscience?加大研發、優化力度，專門推出了針對細胞樣本的高靈敏度亞鐵離子比色法測試盒
細胞亞鐵含量增多是鐵死亡區別其他細胞死亡方式的一個主要特征，其檢測也是鐵死亡研究最常見的指標之一。根據市場熱點反饋，Elabscience®加大研發、優化力度，專門推出了針對細胞樣本的高靈敏度亞鐵離子比色法測試盒
下面整理了一些關于細胞亞鐵檢測的常見問題，助力大家更順利地完成實驗。
Q1：檢測細胞亞鐵需要多少細胞?
本試劑盒每個樣本需準備大約106個細胞。相比以往的亞鐵離子比色法測試盒，樣本需求數量大大減少。
Q2：細胞樣本如何進行破碎處理?
本試劑盒使用細胞裂解液對細胞樣本進行處理，加入裂解液后，只需在冰盒上靜置10分鐘，即可離心取上清液待測，有效提升了細胞破碎效率，同時防止了亞鐵離子的氧化。
Q3：為什么測定的標準品的OD值沒有梯度?
實驗中的標準品為亞鐵離子，在室溫下放置易氧化。最好在使用前按需配制，盡量減少試劑配制完成后的放置時間。另外，優化的試劑盒中配置了專門的標準品稀釋液，可以極大程度地延長標準品配制后的存放時間。
Q4：加入顯色劑時，如何防止酶標板孔中產生氣泡?
酶標板孔中的氣泡會導致儀器檢測時讀取錯誤的OD值。加入顯色液時，可將移液器槍頭貼近板孔內壁，緩慢加入，以減少氣泡的產生，并使用“吸二打一”的移液器操作方式，來避免氣泡的產生。
Q5：試劑盒的檢測波長是多少?
本實驗的顯色物質在593nm波長處有最大的特征吸收峰，在590-600nm波長范圍內都可以進行檢測。
Q6：未能檢出樣本值是什么原因?
可能是測定的細胞中亞鐵離子含量較低，樣本中亞鐵離子含量低于試劑盒檢出限。可適當增加樣本細胞數量，以提高檢測樣本中亞鐵離子的濃度。
Q7：計算最終結果時，
能通過測定蛋白含量進行校正嗎?
本實驗的最終測定結果不適宜用蛋白含量進行校正，因為制備樣本的試劑對蛋白檢測結果有較大干擾。推薦在樣本處理前進行細胞計數，使用細胞數量進行計算校正。
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