
生物素標記試劑盒的原理是活化的生物素的酯鍵和被標記物上的氨基脫水縮合形成穩(wěn)定的酰胺鍵。此外,還可以標記蛋白的N末端。如果蛋白上有伯胺,比如賴氨酸就是可以標記的。

試劑盒檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍,建議實驗前通過相關(guān)文獻預估樣本中待測物的濃度并通過預實驗確定樣本的實際濃度情況。如果是常規(guī)樣本類型,可以咨詢ELISA技術(shù)支持以獲取樣本的推薦稀釋倍數(shù)并安排預實驗檢測。
如果樣品中待測物濃度過高或過低,請對樣本做適當?shù)南♂尰驖饪s。如果樣本中的分析物濃度遠低于試劑盒的最低檢測線,建議選擇靈敏度更高的試劑盒來檢測。

組織樣本:組織研磨后,將其-80℃放置1h/液氮放置0.5h,然后置于30℃水浴鍋中輕微振蕩使其迅速融化,此操作反復1-2次即可。
細胞樣本:按上述反復凍融的操作反復2-3次。若為膜蛋白可以適當超聲一下,但需要控制好超聲的溫度、頻率。
樣本中建議提前加入蛋白酶抑制劑。常規(guī)推薦:PMSF。

溶血可由多種理化因素和毒素引起。在體外,如機械性強力振蕩、低溫冷凍等均可引起溶血。為避免溶血對檢測結(jié)果的影響,請:
(1)靜脈采血時,回抽壓力不宜過大
(2)一次性采血量不宜過少
(3)采集的全血不宜激烈振蕩
(4)離心轉(zhuǎn)速不宜過大
(5)收集的全血需盡快處理成血清/血漿,全血不能凍融
(6)若需要麻醉采血,需使用沒有溶血作用的麻醉劑

目前我們的試劑盒檢測的種屬主要為人,小鼠和大鼠,小部分指標涉及猴,兔,豬和雞等特殊種屬。對于那些命名中帶有特定物種名稱的試劑盒(如人)是專門針對此物種的。如果說明書中沒有指明物種,該試劑盒即在常規(guī)哺乳動物種屬內(nèi)是通用的。其他特殊種屬的檢測適用性請聯(lián)系技術(shù)支持確認。

96T試劑盒,標準品&樣本均不做復孔,最多檢測88個樣本;標準品做復孔,樣本做單孔,最多檢測80個樣本;標準品做單孔,樣本做復孔,最多檢測44個樣本;標準品&樣本均做復孔,最多檢測40個樣本。如果做3復孔,檢測的樣本數(shù)量會相應減少。
為了保證實驗結(jié)果的準確性,我們建議標準品和樣品都做復孔,但是并不是要求ELISA實驗一定要做復孔/3復孔,客戶可根據(jù)自己的需求設定復孔實驗。


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