7個小妙招,教你如何選ELISA試劑盒
發布時間:
2023-05-16
市面上的ELISA試劑盒五花八門,質量良莠不齊。如何浪里淘金,選擇既符合科研需求,又品質上乘的ELISA試劑盒呢?
市面上的ELISA試劑盒五花八門,質量良莠不齊。如何浪里淘金,選擇既符合科研需求,又品質上乘的ELISA試劑盒呢?
Elabscience教你七招,快速搞定ELISA試劑盒的選擇!
01 查找待測樣本的蛋白濃度
通過檢索SCI文獻、Genecards、Mayocliniclabs等,獲得目標蛋白的表達部位及表達濃度參考值,比較ELISA試劑盒中給出的樣本測值與參考值是否一致。
02 明確試劑盒的應用種屬&檢測的樣本類型
不同廠家驗證的樣本類型不同。除試劑盒特別說明外,一般情況下,不同種屬不能通用。常見待測樣本類型有:血清、血漿、細胞上清、組織勻漿、細胞裂解液等。實驗前,需要判斷試劑盒能否滿足目標物種的目標蛋白檢測。
03 明確試劑盒的檢測范圍
試劑盒的檢測范圍即標準曲線范圍。標準曲線范圍不等同于樣本濃度范圍,所以,要特別注意判斷待測樣本濃度是否落在標準曲線范圍內。對于濃度很高的樣本,建議先通過預實驗,摸索出合適的稀釋倍數后,再大量測定樣本。
04 明確試劑盒的國際質控標準
1 稀釋線性
一般指樣本稀釋線性,即:將樣本梯度稀釋,看各稀釋梯度濃度是否成線性;對于高濃度樣本,建議選擇OD值落在標曲范圍中部的稀釋倍數為最佳稀釋倍數。
2 回收率
評估試劑盒測量結果趨于真實值程度的指標。一般添加標準品(重組蛋白)到天然樣本基質內,進行測定。通常,線性及回收率的范圍在80%-120%比較合適。
3 天然樣本檢測
確保試劑盒可以檢測天然樣本及合適的樣本類型??筛鶕械鞍仔再|對天然樣本進行選擇,例如:血清、血漿、細胞上清、尿液、唾液和乳汁等。
4 交叉反應
通過交叉反應評估試劑盒的特異性。交叉反應越小,說明試劑盒的特異性越好。
?與同家族其他蛋白或結構類似物的交叉反應。
?與其他種屬相同靶點蛋白的交叉反應。
?與血清中常見因子的交叉反應。
5干擾試驗
判斷其他分子與抗原-抗體對之間相互作用的影響。干擾性越大,待測物測定值越不準確。
?評估靶蛋白配體的干擾。
?評估靶蛋白受體的干擾。
6穩定性
判定試劑盒在規定條件下儲存時間長短的標準。一般通過熱加速穩定性實驗驗證。
?將試劑盒在37℃條件下放置7天,與4℃條件下放置的相同產品進行比較。
?各項性能檢測結果的偏差均應<15%。
7 精密度
試劑盒重復實驗時,誤差大小的評估標準。通常用CV表示。一般情況下,批間、批內變異系數(CV)均應<15%。
8 最低檢測限
試劑盒靈敏度的判定標準。最低檢測限的值越低,表明試劑盒越靈敏。如果待檢指標含量很低,需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒。
市場上的ELISA試劑盒常被分為低端、中端和高端三類,一般也用這八項質控來定義:
05 選擇美譽度高的品牌
選購試劑盒時,我們要盡量選擇品牌知名度高、美譽度高的品牌,在確保產品質量過關的同時,還能獲得更優質的售前售后服務。常見的國外品牌如R&D、Abcam,國產品牌如Elabscience®等,就在生命科學權威評獎機構CiteAb上,獲得了重要獎項及高度贊譽。該平臺素以產品的引用文獻數量及全球影響力,作為獎項評定指標。
06 選擇性價比高的產品
預算也是選購ELISA產品的要素之一。在保證試劑盒質量可靠的情況下,選擇性價比高的產品。生物學是極其嚴謹的科學,實驗結果的準確性是項目基金、文章等評審必不可少的因素。假如無法完美地獲得或重現實驗結果,即便有低廉的價格,也是資源的另一種浪費。
07 選擇文獻引用多的品牌
挑選ELISA試劑盒時,SCI文獻的引用數量最具參考價值。這也是業界對產品認可程度的一項非常重要的指標。尤其在選擇國內品牌時,一定要多了解該品牌的文獻引用情況(總數量&最高影響因子)以及品牌在業內的口碑。大家可以在Google scholar等文獻搜索引擎,丁香通、小木蟲等行業論壇進行檢驗。
Elabscience® · ELISA試劑盒特點
產品數量多:1300+ELISA試劑盒,涉及10多個研究領域
種屬范圍廣:包含人、小鼠、大鼠、兔、猴、豬等
規格種類多:48T/96T/96T*5
套裝完整性:包含實驗所需整套試劑,方便使用
高精密度:批內、批間CV<10%
良好回收率:80%~120%
高靈敏度:pg級
高特異性:交叉反應率<10%
文獻支持:SCI文獻引用8000+篇
貨期短:大量現貨,2-3個工作日內發貨
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