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Mouse IL-12(Interleukin 12) ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：

E-EL-M3062

中文名：

小鼠白介素12(IL-12)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

別稱：

IL12, IL-12/p70, IL12 p70, IL-12 p70

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所屬分類：

零售價(jià)

￥ 2600

市場價(jià)

￥ 2600

規(guī)格
- 48T
- 96T
- 96T*5

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產(chǎn)品描述

商品名稱: Mouse IL-12(Interleukin 12) ELISA Kit
商品編號(hào): E-EL-M3062
中文名: 小鼠白介素12(IL-12)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
別稱: IL12, IL-12/p70, IL12 p70, IL-12 p70
適應(yīng)種屬: 小鼠
檢測范圍: 0.31~20 pg/mL
靈敏度: 0.17 pg/mL

用途

　　該試劑盒用于體外定量檢測Mouse 血清，血漿或其他生物體液中IL-12濃度

檢測原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠IL-12抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠IL-12會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-12抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗小鼠IL-12抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠IL-12結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，IL-12濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中IL-12的濃度。

反應(yīng)類型	夾心法
規(guī)格	96T
反應(yīng)時(shí)間	3.5h
反應(yīng)性	Mouse
檢測方法	Colormetric
檢測范圍	0.31—20 pg/mL
靈敏度	0.17 pg/mL
樣本體積	100μL
樣本類型	血清，血漿或其他生物體液

特異性

　　可檢測樣本中的小鼠IL-12，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。

重復(fù)性

　　板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。

典型數(shù)據(jù)

　　由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(pg/mL)	O.D	Average	Corrected
20	2.543 2.567	2.555	2.484
10	1.653 1.709	1.681	1.61
5	0.937 0.898	0.918	0.847
2.5	0.518 0.53	0.524	0.453
1.25	0.259 0.237	0.248	0.177
0.63	0.19 0.184	0.187	0.116
0.31	0.124 0.136	0.13	0.059
0	0.066 0.076	0.070	--

精密度

　　板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
　　板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (pg/mL)	0.94	2.48	6.82	0.91	2.37	6.40
Standard deviation	0.06	0.13	0.35	0.05	0.12	0.33
C V (%)	6.48	5.39	5.08	5.61	4.97	5.19

回收率

　　分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Serum (n=8)	84-96	90
EDTA plasma (n=8)	88-100	95
Cell culture media (n=8)	95-110	102

線性

　　分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。

		Serum (n=5)	EDTA plasma (n=5)	Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	85-99	85-96	96-108
1:2	Average (%)	91	91	102
1:4	Range (%)	82-98	86-101	98-109
1:4	Average (%)	89	93	104
1:8	Range (%)	85-98	85-95	95-108
1:8	Average (%)	92	90	101
1:16	Range (%)	87-97	87-100	92-105
1:16	Average (%)	92	93	98

試劑盒組成及保存

　　未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請(qǐng)拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

中文名稱	英文名稱	規(guī)格	保存條件
ELISA酶標(biāo)板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 條	-20℃，可存放6個(gè)月
凍干標(biāo)準(zhǔn)品	Reference Standard	2 支
濃縮生物素化抗體(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
濃縮HRP酶結(jié)合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6個(gè)月
標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6個(gè)月
生物素化抗體稀釋液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶結(jié)合物稀釋液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反應(yīng)終止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 張
產(chǎn)品說明書	Product Description	1 份
質(zhì)檢報(bào)告	Certificate of Analysis	1 份

　　說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
　　試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些，請(qǐng)?jiān)谑褂脮r(shí)量取而非直接倒出。

試驗(yàn)所需自備物品

1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙

操作步驟

	1. 對(duì)應(yīng)板孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘
	2. 棄掉板內(nèi)液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘
	3. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次
	4. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次
	5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
	6. 每孔加入50μL終止液
	7. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù)