本公司產(chǎn)品僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
- 產(chǎn)品對比
- 產(chǎn)品描述
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- 商品名稱: VA(Vitamin A) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-0135c
- 中文名: 維生素A(VA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: VA
- 適應種屬: 人
- 檢測范圍: 15.63~1000 ng/mL
- 靈敏度: 9.38 ng/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中VA濃度。
檢測原理
本試劑盒采用競爭ELISA法。用VA抗原包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的VA與包被的VA競爭生物素標記的抗VA單抗上的結合位點，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，VA濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標準曲線計算出樣品中VA的濃度。
反應類型 競爭法 規(guī)格 96T 反應時間 2.0h 反應性 通用 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 15.63-1000 ng/mL 靈敏度 9.38 ng/mL 樣本體積 50μL 樣本類型 血清、血漿或其他相關生物液體 特異性
可檢測樣本中的VA，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。
(ng/mL) O.D Average 1000 0.266
0.2430.255 500 0.37
0.3690.37 250 0.551
0.5450.548 125 0.827
0.8110.819 62.5 1.126
1.071.098 31.25 1.385
1.4391.412 15.63 1.693
1.7621.728 0 2.506
2.4182.462 
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(ng/mL)41.24 111.72 435.17 48.23 106.85 497.43 Standard
deviation2.07 5.31 22.98 2.54 5.03 23.03 C V (%) 5.02 4.75 5.28 5.27 4.71 4.63 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 99-111 104 EDTA plasma (n=8) 90-104 98 Cell culture media (n=8) 91-99 95 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 89-96 89-98 98-105 Average (%) 92 95 102 1:4 Range (%) 89-104 91-105 96-106 Average (%) 97 99 101 1:8 Range (%) 99-108 84-96 89-102 Average (%) 105 90 95 1:16 Range (%) 84-95 86-99 83-95 Average (%) 92 93 91 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規(guī)格 保存條件 ELISA酶標板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃，可存放6個月 凍干標準品 Reference Standard 2支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光)，可存放6個月 標準品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產(chǎn)品說明書 Product Description 1 份 質(zhì)檢報告 Certificate of Analysis 1 份 說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。試驗所需自備物品
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1.酶標儀(450nm波長濾光片)
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2.高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
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3.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
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4.吸水紙
操作步驟
1. 對應板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘 
2. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次 
3. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次 
4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 
5. 每孔加入50μL終止液 
6. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù)
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