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Mouse TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit

產品貨號：

E-EL-M3063

中文名：

小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫吸附測定試劑盒

別稱：

DIF, TNF-alpha, TNFA, TNFSF2,TNF,TNFa

關鍵詞：

所屬分類：

零售價

￥ 2600

市場價

￥ 2400

規格
- 48T
- 96T
- 96T*5

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產品描述

商品名稱: Mouse TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit
商品編號: E-EL-M3063
中文名: 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫吸附測定試劑盒
別稱: DIF, TNF-alpha, TNFA, TNFSF2,TNF,TNFa
適應種屬: 小鼠
檢測范圍: 7.81~500 pg/mL
靈敏度: 4.69 pg/mL

用途

　　該試劑盒用于體外定量檢測Mouse 血清，血漿或其他生物體液中TNF-α濃度

檢測原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠TNF-α抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的小鼠TNF-α會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠TNF-α抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗小鼠TNF-α抗體與結合在包被抗體上的小鼠TNF-α結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，TNF-α濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中TNF-α的濃度。

反應類型	夾心法
規格	96T
反應時間	3.5h
反應性	Mouse
檢測方法	Colormetric
檢測范圍	7.81—500 pg/mL
靈敏度	4.69 pg/mL
樣本體積	100μL
樣本類型	血清，血漿或其他生物體液

特異性

　　可檢測樣本中的小鼠TNF-α，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。

重復性

　　板內，板間變異系數均<10%。

典型數據

　　由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。

(pg/mL)	O.D	Average	Corrected
500	2.59 2.61	2.6	2.536
250	1.716 1.756	1.736	1.672
125	1.047 1.037	1.042	0.978
62.5	0.555 0.557	0.556	0.492
31.25	0.303 0.287	0.295	0.231
15.63	0.19 0.164	0.177	0.113
7.81	0.114 0.126	0.12	0.056
0	0.061 0.067	0.064	--

精密度

　　板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
　　板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (pg/mL)	23.99	59.60	188.68	25.90	59.84	172.83
Standard deviation	1.42	3.47	6.40	1.68	2.46	7.50
C V (%)	5.93	5.82	3.39	6.50	4.11	4.34

回收率

　　分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Serum (n=8)	95-112	102
EDTA plasma (n=8)	94-112	102
Cell culture media (n=8)	93-107	100

線性

　　分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。

		Serum (n=5)	EDTA plasma (n=5)	Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	92-105	89-103	92-106
1:2	Average (%)	98	95	99
1:4	Range (%)	93-110	90-105	90-102
1:4	Average (%)	100	96	96
1:8	Range (%)	91-105	89-105	92-109
1:8	Average (%)	97	97	100
1:16	Range (%)	86-101	87-99	91-104
1:16	Average (%)	93	94	98

試劑盒組成及保存

　　未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

中文名稱	英文名稱	規格	保存條件
ELISA酶標板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 條	-20℃，可存放6個月
凍干標準品	Reference Standard	2 支
濃縮生物素化抗體(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
濃縮HRP酶結合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6個月
標準品&樣品稀釋液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6個月
生物素化抗體稀釋液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶結合物稀釋液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反應終止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 張
產品說明書	Product Description	1 份
質檢報告	Certificate of Analysis	1 份

　　說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
　　試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。

試驗所需自備物品

1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙

操作步驟

	1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘
	2. 棄掉板內液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘
	3. 棄掉板內液體，洗板3次
	4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次
	5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
	6. 每孔加入50μL終止液
	7. 立即在450nm波長下讀數，處理數據