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DA(Dopamine) ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：

E-EL-0046c

中文名：

多巴胺(DA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

別稱：

2-(3, 4-dihydroxyphenyl)ethylamine, 3, 4-dihydroxyphenethylamine, 3-hydroxytyramine, DA, Intropin, Revivan, Oxytyramine

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所屬分類：

零售價(jià)

￥ 1650

市場價(jià)

￥ 1650

規(guī)格
- 48T
- 96T
- 96T*5

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產(chǎn)品描述

商品名稱: DA(Dopamine) ELISA Kit
商品編號(hào): E-EL-0046c
中文名: 多巴胺(DA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
別稱: 2-(3, 4-dihydroxyphenyl)ethylamine, 3, 4-dihydroxyphenethylamine, 3-hydroxytyramine, DA, Intropin, Revivan, Oxytyramine
適應(yīng)種屬: 人
檢測范圍: 31.25~2000 pg/mL
靈敏度: 18.75 pg/mL

用途

　　該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中DA濃度。

檢測原理

　　本試劑盒采用競爭ELISA法。用DA抗原包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的DA與包被的DA競爭生物素標(biāo)記的抗DA單抗上的結(jié)合位點(diǎn)，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，DA濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中DA的濃度。

反應(yīng)類型	競爭法
規(guī)格	96T
反應(yīng)時(shí)間	2.0h
反應(yīng)性	通用
檢測方法	Colormetric
檢測范圍	31.25-2000 pg/mL
靈敏度	18.75 pg/mL
樣本體積	50μL
樣本類型	血清、血漿或其他相關(guān)生物液體

特異性

　　可檢測樣本中的DA，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。

重復(fù)性

　　板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。

典型數(shù)據(jù)

　　由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(pg/mL)	O.D	Average
2000	0.342 0.372	0.357
1000	0.446 0.502	0.474
500	0.687 0.657	0.672
250	0.965 0.967	0.966
125	1.325 1.319	1.322
62.5	1.674 1.654	1.664
31.25	1.922 1.928	1.925
0	2.281 2.295	2.288

精密度

　　板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
　　板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (pg/mL)	93.20	168.70	786.20	94.20	159.90	725.00
Standard deviation	6.10	7.40	29.10	5.30	9.00	37.00
C V (%)	6.55	4.39	3.70	5.63	5.63	5.10

回收率

　　分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Serum (n=8)	95-110	101
EDTA plasma (n=8)	97-111	102
Cell culture media (n=8)	92-103	98

線性

　　分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。

		Serum (n=5)	EDTA plasma (n=5)	Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	92-106	95-109	91-103
1:2	Average (%)	99	103	98
1:4	Range (%)	91-103	89-105	97-114
1:4	Average (%)	96	96	105
1:8	Range (%)	91-103	92-104	99-113
1:8	Average (%)	96	99	105
1:16	Range (%)	86-98	91-105	93-108
1:16	Average (%)	92	99	100

試劑盒組成及保存

　　未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

中文名稱	英文名稱	規(guī)格	保存條件
ELISA酶標(biāo)板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 條	-20℃，可存放6個(gè)月
凍干標(biāo)準(zhǔn)品	Reference Standard	2支
濃縮生物素化抗體(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
濃縮HRP酶結(jié)合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6個(gè)月
標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6個(gè)月
生物素化抗體稀釋液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶結(jié)合物稀釋液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反應(yīng)終止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 張
產(chǎn)品說明書	Product Description	1 份
質(zhì)檢報(bào)告	Certificate of Analysis	1 份

　　說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
　　試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些，請?jiān)谑褂脮r(shí)量取而非直接倒出。

試驗(yàn)所需自備物品

1.酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4.吸水紙

操作步驟

	1. 對應(yīng)板孔中加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘
	2. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次
	3. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次
	4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
	5. 每孔加入50μL終止液
	6. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù)