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cAMP(Cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit

產(chǎn)品貨號：

E-EL-0056c

中文名：

環(huán)磷酸腺苷(cAMP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

別稱：

Cyclic adenosine monophosphate, cAMP, cyclic AMP, 3'-5'-cyclic adenosine monophosphate

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所屬分類：

零售價(jià)

￥ 1650

市場價(jià)

￥ 1650

規(guī)格
- 48T
- 96T
- 96T*5

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產(chǎn)品描述

商品名稱: cAMP(Cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit
商品編號: E-EL-0056c
中文名: 環(huán)磷酸腺苷(cAMP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
別稱: Cyclic adenosine monophosphate, cAMP, cyclic AMP, 3'-5'-cyclic adenosine monophosphate
適應(yīng)種屬: 人
檢測范圍: 1.56~100 ng/mL
靈敏度: 0.94 ng/mL

用途

　　該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中cAMP濃度。

檢測原理

　　本試劑盒采用競爭ELISA法。用cAMP抗原包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的cAMP與包被的cAMP競爭生物素標(biāo)記的抗cAMP單抗上的結(jié)合位點(diǎn)，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，cAMP濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中cAMP的濃度。

反應(yīng)類型	競爭法
規(guī)格	96T
反應(yīng)時(shí)間	2.0h
反應(yīng)性	通用
檢測方法	Colormetric
檢測范圍	1.56-100 ng/mL
靈敏度	0.94 ng/mL
樣本體積	50μL
樣本類型	血清、血漿或其他相關(guān)生物液體

特異性

　　可檢測樣本中的cAMP，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。

重復(fù)性

　　板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。

典型數(shù)據(jù)

　　由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(ng/mL)	O.D	Average
100	0.359 0.409	0.384
50	0.474 0.512	0.493
25	0.708 0.682	0.695
12.5	1.004 1.036	1.02
6.25	1.47 1.44	1.455
3.13	1.912 1.896	1.904
1.56	2.263 2.271	2.267
0	2.757 2.769	2.763

精密度

　　板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
　　板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (ng/mL)	5.40	14.10	37.40	5.90	15.00	34.90
Standard deviation	0.30	0.70	2.00	0.40	0.90	1.80
C V (%)	5.56	4.96	5.35	6.78	6.00	5.16

回收率

　　分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Serum (n=8)	89-104	95
EDTA plasma (n=8)	86-100	92
Cell culture media (n=8)	87-100	92

線性

　　分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。

		Serum (n=5)	EDTA plasma (n=5)	Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	88-100	85-100	86-98
1:2	Average (%)	94	92	92
1:4	Range (%)	91-103	87-101	101-114
1:4	Average (%)	97	92	107
1:8	Range (%)	84-98	90-102	99-116
1:8	Average (%)	91	97	107
1:16	Range (%)	86-100	90-102	99-114
1:16	Average (%)	92	97	105

試劑盒組成及保存

　　未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

中文名稱	英文名稱	規(guī)格	保存條件
ELISA酶標(biāo)板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 條	-20℃，可存放6個(gè)月
凍干標(biāo)準(zhǔn)品	Reference Standard	2支
濃縮生物素化抗體(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
濃縮HRP酶結(jié)合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6個(gè)月
標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6個(gè)月
生物素化抗體稀釋液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶結(jié)合物稀釋液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反應(yīng)終止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 張
產(chǎn)品說明書	Product Description	1 份
質(zhì)檢報(bào)告	Certificate of Analysis	1 份

　　說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
　　試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些，請?jiān)谑褂脮r(shí)量取而非直接倒出。

試驗(yàn)所需自備物品

1.酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4.吸水紙

操作步驟

	1. 對應(yīng)板孔中加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘
	2. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次
	3. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次
	4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
	5. 每孔加入50μL終止液
	6. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù)