- 產品對比
- 產品描述
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- 商品名稱: PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-0034c
- 中文名: 前列腺素E2(PGE2)酶聯免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: PG-E2, Dinoprostone
- 適應種屬: 人
- 檢測范圍: 31.25~2000 pg/mL
- 靈敏度: 18.75 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中PGE2濃度。
檢測原理
本試劑盒采用競爭ELISA法。用PGE2抗原包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的PGE2與包被的PGE2競爭生物素標記的抗PGE2單抗上的結合位點,游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素,生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,PGE2濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標準曲線計算出樣品中PGE2的濃度。
反應類型 競爭法 規格 96T 反應時間 2.0h 反應性 通用 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 31.25-2000 pg/mL 靈敏度 18.75 pg/mL 樣本體積 50μL 樣本類型 血清、血漿或其他相關生物液體 特異性
可檢測樣本中的PGE2,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內,板間變異系數均<10%。
典型數據
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(pg/mL) O.D Average 2000 0.381
0.3930.387 1000 0.489
0.5170.503 500 0.702
0.6960.699 250 0.974
1.0020.988 125 1.341
1.3311.336 62.5 1.674
1.6621.668 31.25 1.913
1.9251.919 0 2.261
2.2692.265 精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)101.30 236.80 779.30 96.00 259.90 728.60 Standard
deviation6.60 11.60 42.10 4.90 13.80 31.30 C V (%) 6.52 4.90 5.40 5.10 5.31 4.30 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 92-109 99 EDTA plasma (n=8) 87-99 94 Cell culture media (n=8) 86-96 91 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 95-110 91-104 89-101 Average (%) 103 98 96 1:4 Range (%) 85-95 89-101 101-117 Average (%) 90 95 107 1:8 Range (%) 87-100 92-104 96-111 Average (%) 92 97 102 1:16 Range (%) 88-104 93-105 99-114 Average (%) 95 98 106 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規格 保存條件 ELISA酶標板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃,可存放6個月 凍干標準品 Reference Standard 2支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6個月 標準品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產品說明書 Product Description 1 份 質檢報告 Certificate of Analysis 1 份 說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。試驗所需自備物品
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1.酶標儀(450nm波長濾光片)
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2.高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
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3.37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
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4.吸水紙
操作步驟
1. 對應板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后,立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液,37℃孵育45分鐘 2. 棄掉板內液體,洗板3次 3. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內液體,洗板5次 4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 5. 每孔加入50μL終止液 6. 立即在450nm波長下讀數,處理數據
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