Human VEGF-A(Vascular Endothelial Cell Growth Factor A) ELISA Kit
產(chǎn)品貨號:
E-EL-H0111c
中文名:
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子A(VEGF-A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
別稱:
VEGF-A, VEGFA, MVCD1, VPF
所屬分類:
零售價(jià)
¥ 2400
市場價(jià)
¥ 2400
-
規(guī)格
- 48T
- 96T
- 96T*5
庫存剩余
2997
隱藏域元素占位
- 產(chǎn)品對比
- 產(chǎn)品描述
-
- 商品名稱: Human VEGF-A(Vascular Endothelial Cell Growth Factor A) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-H0111c
- 中文名: 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子A(VEGF-A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: VEGF-A, VEGFA, MVCD1, VPF
- 適應(yīng)種屬: 人
- 檢測范圍: 31.25~2000 pg/mL
- 靈敏度: 18.75 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中VEGF-A濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人VEGF-A抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人VEGF-A會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人VEGF-A抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??谷薞EGF-A抗體與結(jié)合在包被抗體上的人VEGF-A結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,VEGF-A濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中VEGF-A的濃度。
反應(yīng)類型 夾心法 規(guī)格 96T 反應(yīng)時間 3.5h 反應(yīng)性 Human 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 31.25—2000 pg/mL 靈敏度 18.75 pg/mL 樣本體積 100μL 樣本類型 血清,血漿或其他生物體液 特異性
可檢測樣本中的人VEGF-A,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(pg/mL) O.D Average Corrected 2000 2.491
2.5012.496 2.412 1000 1.599
1.6311.615 1.531 500 0.939
0.9050.923 0.839 250 0.426
0.4620.444 0.36 125 0.276
0.2580.267 0.183 62.5 0.199
0.1690.184 0.1 31.25 0.131
0.1410.136 0.052 0 0.081
0.0850.084 -- 精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)94.10 279.80 737.20 92.40 303.90 745.00 Standard
deviation5.50 14.30 34.60 4.80 15.50 31.30 C V (%) 5.84 5.11 4.69 5.19 5.10 4.20 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 92-105 98 EDTA plasma (n=8) 95-110 101 Cell culture media (n=8) 88-103 96 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 99-114 97-111 91-105 Average (%) 105 104 99 1:4 Range (%) 95-112 80-95 93-106 Average (%) 103 87 98 1:8 Range (%) 100-116 86-100 97-110 Average (%) 106 93 103 1:16 Range (%) 96-110 82-92 96-107 Average (%) 104 87 102 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規(guī)格 保存條件 ELISA酶標(biāo)板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃,可存放6個月 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 Reference Standard 2 支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結(jié)合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6個月 標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結(jié)合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應(yīng)終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產(chǎn)品說明書 Product Description 1 份 質(zhì)檢報(bào)告 Certificate of Analysis 1 份 說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時會比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些,請?jiān)谑褂脮r量取而非直接倒出。試驗(yàn)所需自備物品
-
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
-
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
-
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
-
4. 吸水紙
操作步驟
1. 對應(yīng)板孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘 2. 棄掉板內(nèi)液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘 3. 棄掉板內(nèi)液體,洗板3次 4. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內(nèi)液體,洗板5次 5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 6. 每孔加入50μL終止液 7. 立即在450nm波長下讀數(shù),處理數(shù)據(jù)
歡迎您的留言咨詢


聯(lián)系我們
Copyright ? 2023 武漢睿華生物科技有限公司
SEO | 營業(yè)執(zhí)照 | 已支持IPv6訪問
SEO | 營業(yè)執(zhí)照 | 已支持IPv6訪問