- 產品對比
- 產品描述
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- 商品名稱: Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-H0149c
- 中文名: 人白介素1β(IL-1β)酶聯免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: IL1B, IL1-BETA, IL1F2, catabolin
- 適應種屬: 人
- 檢測范圍: 7.81~500 pg/mL
- 靈敏度: 4.69 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中IL-1β濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人IL-1β抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的人IL-1β會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-1β抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人IL-1β抗體與結合在包被抗體上的人IL-1β結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,IL-1β濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中IL-1β的濃度。
反應類型 夾心法 規格 96T 反應時間 3.5h 反應性 Human 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 7.81—500 pg/mL 靈敏度 4.69 pg/mL 樣本體積 100μL 樣本類型 血清,血漿或其他生物體液 特異性
可檢測樣本中的人IL-1β,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內,板間變異系數均<10%。
典型數據
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(pg/mL) O.D Average Corrected 500 2.387
2.4032.395 2.318 250 1.684
1.7061.695 1.618 125 0.956
0.9320.944 0.867 62.5 0.532
0.5380.535 0.458 31.25 0.299
0.2790.289 0.212 15.63 0.192
0.1680.18 0.103 7.81 0.123
0.1370.13 0.053 0 0.068
0.0850.077 -- 精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)27.70 46.20 197.60 29.10 47.80 192.60 Standard
deviation1.40 2.60 9.50 1.70 2.80 6.00 C V (%) 5.05 5.63 4.81 5.84 5.86 3.12 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 94-110 100 EDTA plasma (n=8) 89-102 95 Cell culture media (n=8) 84-98 91 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 95-109 88-100 94-108 Average (%) 102 94 102 1:4 Range (%) 95-109 82-94 93-105 Average (%) 100 88 99 1:8 Range (%) 98-110 82-95 97-109 Average (%) 105 88 103 1:16 Range (%) 96-108 80-91 97-113 Average (%) 102 86 103 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規格 保存條件 ELISA酶標板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃,可存放6個月 凍干標準品 Reference Standard 2 支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6個月 標準品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產品說明書 Product Description 1 份 質檢報告 Certificate of Analysis 1 份 說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。試驗所需自備物品
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1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
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2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
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3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
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4. 吸水紙
操作步驟
1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘 2. 棄掉板內液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘 3. 棄掉板內液體,洗板3次 4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內液體,洗板5次 5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 6. 每孔加入50μL終止液 7. 立即在450nm波長下讀數,處理數據
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