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Mouse INS(Insulin) ELISA Kit

產品貨號：

E-EL-M2614c

中文名：

小鼠胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒

別稱：

IDDM2, ILPR, IRDN, MODY10

關鍵詞：

所屬分類：

零售價

￥ 2400

市場價

￥ 2400

規格
- 48T
- 96T
- 96T*5

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產品描述

商品名稱: Mouse INS(Insulin) ELISA Kit
商品編號: E-EL-M2614c
中文名: 小鼠胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒
別稱: IDDM2, ILPR, IRDN, MODY10
適應種屬: 小鼠
檢測范圍: 0.31~20 ng/mL
靈敏度: 0.19 ng/mL

用途

　　該試劑盒用于體外定量檢測Mouse 細胞培養上清，組織勻漿上清中INS濃度

檢測原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠INS抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的小鼠INS會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠INS抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗小鼠INS抗體與結合在包被抗體上的小鼠INS結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，INS濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中INS的濃度。

反應類型	夾心法
規格	96T
反應時間	3.5h
反應性	Mouse
檢測方法	Colormetric
檢測范圍	0.31—20 ng/mL
靈敏度	0.19 ng/mL
樣本體積	100μL
樣本類型	細胞培養上清，組織勻漿上清

特異性

　　可檢測樣本中的小鼠INS，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。

重復性

　　板內，板間變異系數均<10%。

典型數據

　　由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。

(ng/mL)	O.D	Average	Corrected
20	2.326 2.372	2.349	2.28
10	1.584 1.602	1.593	1.524
5	0.994 0.954	0.974	0.905
2.5	0.437 0.443	0.44	0.371
1.25	0.248 0.248	0.248	0.179
0.63	0.174 0.168	0.171	0.102
0.31	0.116 0.124	0.12	0.051
0	0.061 0.077	0.069	--

精密度

　　板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
　　板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (ng/mL)	1.00	2.30	8.50	1.00	2.30	8.70
Standard deviation	0.10	0.10	0.40	0.10	0.10	0.30
C V (%)	10.00	4.35	4.71	10.00	4.35	3.45

回收率

　　分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Cell culture media (n=8)	95-110	101

線性

　　分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。

		Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	93-107
1:2	Average (%)	99
1:4	Range (%)	96-113
1:4	Average (%)	103
1:8	Range (%)	96-111
1:8	Average (%)	104
1:16	Range (%)	97-110
1:16	Average (%)	103

試劑盒組成及保存

　　未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

中文名稱	英文名稱	規格	保存條件
ELISA酶標板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 條	-20℃，可存放6個月
凍干標準品	Reference Standard	2 支
濃縮生物素化抗體(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
濃縮HRP酶結合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6個月
標準品&樣品稀釋液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6個月
生物素化抗體稀釋液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶結合物稀釋液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反應終止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 張
產品說明書	Product Description	1 份
質檢報告	Certificate of Analysis	1 份

　　說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
　　試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。

試驗所需自備物品

1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙

操作步驟

	1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘
	2. 棄掉板內液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘
	3. 棄掉板內液體，洗板3次
	4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次
	5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
	6. 每孔加入50μL終止液
	7. 立即在450nm波長下讀數，處理數據