- 產(chǎn)品對比
- 產(chǎn)品描述
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- 商品名稱: Mouse Ang-Ⅱ(Angiotensin Ⅱ) ELISA Kit
- 商品編號(hào): E-EL-M2612c
- 中文名: 小鼠血管緊張素Ⅱ(Ang-Ⅱ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: Angiotensin-2
- 適應(yīng)種屬: 小鼠
- 檢測范圍: 15.63~1000 pg/mL
- 靈敏度: 9.38 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測小鼠血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中Ang-Ⅱ濃度。
檢測原理
本試劑盒采用競爭ELISA法。用小鼠Ang-Ⅱ抗原包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠Ang-Ⅱ與包被的小鼠Ang-Ⅱ競爭生物素標(biāo)記的抗小鼠Ang-Ⅱ單抗上的結(jié)合位點(diǎn),游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,小鼠Ang-Ⅱ濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中小鼠Ang-Ⅱ的濃度。
反應(yīng)類型 競爭法 規(guī)格 96T 反應(yīng)時(shí)間 2.0h 反應(yīng)性 小鼠 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 15.63-1000 pg/mL 靈敏度 9.38 pg/mL 樣本體積 50μL 樣本類型 血清、血漿或其他相關(guān)生物液體 特異性
可檢測樣本中的小鼠Ang-Ⅱ,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(pg/mL) O.D Average 1000 0.346
0.40.373 500 0.475
0.4850.48 250 0.686
0.6620.674 125 0.976
1.0020.989 62.5 1.417
1.4151.416 31.25 1.886
1.8561.871 15.63 2.244
2.2562.25 0 2.804
2.8162.81 精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)46.00 138.00 442.80 42.50 130.80 407.70 Standard
deviation2.40 8.10 22.10 2.70 6.90 17.50 C V (%) 5.22 5.87 4.99 6.35 5.28 4.29 回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 92-105 100 EDTA plasma (n=8) 85-101 92 Cell culture media (n=8) 86-100 91 線性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 87-99 90-102 87-97 Average (%) 94 96 92 1:4 Range (%) 83-98 90-102 100-115 Average (%) 90 96 107 1:8 Range (%) 89-103 87-100 99-111 Average (%) 95 94 105 1:16 Range (%) 90-103 91-104 93-107 Average (%) 95 97 100 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規(guī)格 保存條件 ELISA酶標(biāo)板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃,可存放6個(gè)月 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 Reference Standard 2支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結(jié)合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6個(gè)月 標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個(gè)月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結(jié)合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應(yīng)終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產(chǎn)品說明書 Product Description 1 份 質(zhì)檢報(bào)告 Certificate of Analysis 1 份 說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì)比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些,請?jiān)谑褂脮r(shí)量取而非直接倒出。試驗(yàn)所需自備物品
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1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
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2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
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3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
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4. 吸水紙
操作步驟
1. 對應(yīng)板孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘 2. 棄掉板內(nèi)液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘 3. 棄掉板內(nèi)液體,洗板3次 4. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內(nèi)液體,洗板5次 5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 6. 每孔加入50μL終止液 7. 立即在450nm波長下讀數(shù),處理數(shù)據(jù)
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