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ST/5-HT(Serotonin/5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit

產品貨號：

E-EL-0033c

中文名：

血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

別稱：

5HT, Enteramine, Thrombocytin, Thrombotonin, 3-(β-Aminoethyl)-5-hydroxyindole

關鍵詞：

所屬分類：

零售價

￥ 1650

市場價

￥ 1650

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產品描述

商品名稱: ST/5-HT(Serotonin/5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit
商品編號: E-EL-0033c
中文名: 血清素/5-羥色胺(ST/5-HT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
別稱: 5HT, Enteramine, Thrombocytin, Thrombotonin, 3-(β-Aminoethyl)-5-hydroxyindole
適應種屬: 通用
檢測范圍: 15.63~1000 ng/mL
靈敏度: 9.38 ng/mL

用途

該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中ST/5-HT濃度。

檢測原理

本試劑盒采用競爭ELISA法。用ST/5-HT抗原包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的ST/5-HT與包被的ST/5-HT競爭生物素標記的抗ST/5-HT單抗上的結合位點，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，ST/5-HT濃度與OD450值之間呈反比，通過繪制標準曲線計算出樣品中ST/5-HT的濃度。

反應類型	競爭法
規(guī)格	96T
反應時間	2.0h
反應性	通用
檢測方法	Colormetric
檢測范圍	15.63-1000ng/mL
靈敏度	9.38 ng/mL
樣本體積	50μL
樣本類型	血清、血漿或其他相關生物液體

特異性

可檢測樣本中的ST/5-HT，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。

重復性

板內，板間變異系數(shù)均<10%。

典型數(shù)據(jù)

由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。

(ng/mL)	O.D	Average
1000	0.402 0.426	0.414
500	0.528 0.532	0.53
250	0.73 0.722	0.726
125	1.004 1.018	1.011
62.5	1.355 1.343	1.349
31.25	1.674 1.654	1.664
15.63	1.899 1.901	1.9
0	2.217 2.221	2.219

精密度

板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。

	Intra-assay Precision			Inter-assay Precision
Sample	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Mean (ng/mL)	51.20	141.30	362.70	54.70	132.00	351.00
Standard deviation	3.50	5.90	15.60	3.10	6.50	16.10
C V (%)	6.84	4.18	4.30	5.67	4.92	4.59

回收率

分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Serum (n=8)	95-107	100
EDTA plasma (n=8)	86-99	92
Cell culture media (n=8)	91-105	98

線性

分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。

		Serum (n=5)	EDTA plasma (n=5)	Cell culture media (n=5)
1:2	Range (%)	90-104	86-99	97-112
1:2	Average (%)	97	92	104
1:4	Range (%)	83-96	92-103	96-108
1:4	Average (%)	90	98	102
1:8	Range (%)	84-97	86-99	93-108
1:8	Average (%)	90	92	101
1:16	Range (%)	84-97	94-107	94-109
1:16	Average (%)	90	99	100

試劑盒組成及保存

未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。

中文名稱	英文名稱	規(guī)格	保存條件
ELISA酶標板(可拆卸)	Micro ELISA Plate(Dismountable)	8 孔×12 條	-20℃，可存放6個月
凍干標準品	Reference Standard	2支
濃縮生物素化抗體(100×)	Concentrated Biotinylated Detection Ab	1支 120 μL
濃縮HRP酶結合物(100×)	Concentrated HRP Conjugate	1支 120 μL	-20℃(避光)，可存放6個月
標準品&樣品稀釋液	Reference Standard & Sample Diluent	1瓶 20 mL	2-8℃.可存放6個月
生物素化抗體稀釋液	Biotinylated Detection Ab Diluent	1瓶 14 mL
酶結合物稀釋液	HRP Conjugate Diluent	1瓶 14 mL
濃縮洗滌液(25×)	Concentrated Wash Buffer (25×)	1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)	Substrate Reagent	1瓶 10 mL	2-8℃(避光)
反應終止液	Stop Solution	1瓶 10 mL	2-8℃
封板覆膜	Plate Sealer	5 張
產品說明書	Product Description	1 份
質檢報告	Certificate of Analysis	1 份

說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。

試驗所需自備物品

1.酶標儀(450nm波長濾光片)
2.高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4.吸水紙

操作步驟

	1. 對應板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘
	2. 棄掉板內液體，洗板3次
	3. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次
	4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
	5. 每孔加入50μL終止液
	6. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù)