- 產品對比
- 產品描述
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- 商品名稱: fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-0079c
- 中文名: 游離三碘甲狀腺原氨酸(fT3)酶聯免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: fT3
- 適應種屬: 人
- 檢測范圍: 1.56~100 pg/mL
- 靈敏度: 0.94 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中fT3濃度。
檢測原理
本試劑盒采用競爭ELISA法。用fT3抗原包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的fT3與包被的fT3競爭生物素標記的抗fT3單抗上的結合位點,游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素,生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,fT3濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標準曲線計算出樣品中fT3的濃度。
反應類型 競爭法 規格 96T 反應時間 2.0h 反應性 通用 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 1.56-100 pg/mL 靈敏度 0.94 pg/mL 樣本體積 50μL 樣本類型 血清、血漿或其他相關生物液體 特異性
可檢測樣本中的fT3,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內,板間變異系數均<10%。
典型數據
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(pg/mL) O.D Average 100 0.271
0.2870.279 50 0.431
0.4440.438 25 0.634
0.6350.635 12.5 0.879
0.8820.881 6.25 1.103
1.1741.139 3.13 1.497
1.4551.476 1.56 1.818
1.8081.813 0 2.338
2.2972.318 精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)4.16 12.43 47.53 4.84 11.65 49.47 Standard
deviation0.23 0.59 2.44 0.24 0.57 2.40 C V (%) 5.53 4.75 5.13 4.96 4.89 4.85 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 88-95 91 EDTA plasma (n=8) 96-108 104 Cell culture media (n=8) 101-107 104 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 88-98 91-104 88-98 Average (%) 93 96 95 1:4 Range (%) 91-106 90-103 95-105 Average (%) 98 97 100 1:8 Range (%) 92-100 90-104 91-102 Average (%) 95 96 95 1:16 Range (%) 99-110 88-95 88-96 Average (%) 102 92 91 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規格 保存條件 ELISA酶標板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃,可存放6個月 凍干標準品 Reference Standard 2支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6個月 標準品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產品說明書 Product Description 1 份 質檢報告 Certificate of Analysis 1 份 說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。試驗所需自備物品
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1.酶標儀(450nm波長濾光片)
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2.高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
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3.37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
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4.吸水紙
操作步驟
1. 對應板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后,立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液,37℃孵育45分鐘 2. 棄掉板內液體,洗板3次 3. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內液體,洗板5次 4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右 5. 每孔加入50μL終止液 6. 立即在450nm波長下讀數,處理數據
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