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    編號 :

    E-EL-0079c

    fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit

    產品貨號:

    E-EL-0079c

    中文名:

    游離三碘甲狀腺原氨酸(fT3)酶聯免疫吸附測定試劑盒

    別稱:

    fT3

    所屬分類:

    零售價

    ¥ 1650

    市場價

    ¥ 1650


    • 規格
      • 48T
      • 96T
      • 96T*5
    數量
    -
    +

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    • 產品描述
      • 商品名稱: fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit
      • 商品編號: E-EL-0079c
      • 中文名: 游離三碘甲狀腺原氨酸(fT3)酶聯免疫吸附測定試劑盒
      • 別稱: fT3
      • 適應種屬:
      • 檢測范圍: 1.56~100 pg/mL
      • 靈敏度: 0.94 pg/mL

      用途


        該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關生物液體中fT3濃度。

       

      檢測原理


        本試劑盒采用競爭ELISA法。用fT3抗原包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的fT3與包被的fT3競爭生物素標記的抗fT3單抗上的結合位點,游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標記的親和素,生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,fT3濃度與OD450值之間呈反比,通過繪制標準曲線計算出樣品中fT3的濃度。
       

      反應類型 競爭法
      規格 96T
      反應時間 2.0h
      反應性 通用
      檢測方法 Colormetric
      檢測范圍 1.56-100 pg/mL
      靈敏度 0.94 pg/mL
      樣本體積 50μL
      樣本類型 血清、血漿或其他相關生物液體

       

      特異性


        可檢測樣本中的fT3,且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。

       

      重復性


        板內,板間變異系數均<10%。

       

      典型數據


        由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
       

      (pg/mL) O.D Average
      100 0.271
      0.287
      0.279
      50 0.431
      0.444
      0.438
      25 0.634
      0.635
      0.635
      12.5 0.879
      0.882
      0.881
      6.25 1.103
      1.174
      1.139
      3.13 1.497
      1.455
      1.476
      1.56 1.818
      1.808
      1.813
      0 2.338
      2.297
      2.318
      1

       

      精密度


        板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
        板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
       

        Intra-assay Precision Inter-assay Precision
      Sample 1 2 3 1 2 3
      n 20 20 20 20 20 20
      Mean
      (pg/mL)
      4.16 12.43 47.53 4.84 11.65 49.47
      Standard
      deviation
      0.23 0.59 2.44 0.24 0.57 2.40
      C V (%) 5.53 4.75 5.13 4.96 4.89 4.85

       

      回收率


        分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
       

      Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
      Serum (n=8) 88-95 91
      EDTA plasma (n=8) 96-108 104
      Cell culture media (n=8) 101-107 104

       

      線性


        分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
       

          Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5)
      1:2 Range (%) 88-98 91-104 88-98
      Average (%) 93 96 95
      1:4 Range (%) 91-106 90-103 95-105
      Average (%) 98 97 100
      1:8 Range (%) 92-100 90-104 91-102
      Average (%) 95 96 95
      1:16 Range (%) 99-110 88-95 88-96
      Average (%) 102 92 91

       

      試劑盒組成及保存


        未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用試劑盒,請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
       

      中文名稱 英文名稱 規格 保存條件
      ELISA酶標板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃,可存放6個月
      凍干標準品 Reference Standard 2支
      濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL
      濃縮HRP酶結合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光),可存放6個月
      標準品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月
      生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL
      酶結合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL
      濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL
      底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光)
      反應終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃
      封板覆膜 Plate Sealer 5 張  
      產品說明書 Product Description 1 份
      質檢報告 Certificate of Analysis 1 份

        說明:所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
        試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些,請在使用時量取而非直接倒出。

       

      試驗所需自備物品


      • 1.酶標儀(450nm波長濾光片)

      • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL

      • 3.37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水

      • 4.吸水紙

       

      操作步驟


      1 1. 對應板孔中加入50μL標準品工作液或樣本后,立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液,37℃孵育45分鐘
      1 2. 棄掉板內液體,洗板3次
      1 3. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內液體,洗板5次
      1 4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右
      1 5. 每孔加入50μL終止液
      1 6. 立即在450nm波長下讀數,處理數據
       

       

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