本公司產品僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
- 產品對比
- 產品描述
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- 商品名稱: Mouse NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-M0828c
- 中文名: 小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)酶聯免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: LCN2, Lipocalin 2, Oncogene 24p3, MSFI
- 適應種屬: 小鼠
- 檢測范圍: 39.06~2500 pg/mL
- 靈敏度: 23.44 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Mouse 血清，血漿或其他生物體液中NGAL濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠NGAL抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的小鼠NGAL會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠NGAL抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗小鼠NGAL抗體與結合在包被抗體上的小鼠NGAL結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，NGAL濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中NGAL的濃度。
反應類型 夾心法 規格 96T 反應時間 3.5h 反應性 Mouse 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 39.06—2500 pg/mL 靈敏度 23.44 pg/mL 樣本體積 100μL 樣本類型 血清，血漿或其他生物體液 特異性
可檢測樣本中的小鼠NGAL，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內，板間變異系數均<10%。
典型數據
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
(pg/mL) O.D Average Corrected 2500 2.17
2.2182.194 2.136 1250 1.493
1.5131.503 1.445 625 0.768
0.7560.762 0.704 312.5 0.431
0.4530.442 0.384 156.25 0.229
0.2210.225 0.167 78.13 0.146
0.1440.145 0.085 39.06 0.094
0.1140.104 0.046 0 0.054
0.0620.058 -- 
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。Intra-assay Precision Inter-assay Precision Sample 1 2 3 1 2 3 n 20 20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)119.40 390.07 1093.66 121.64 352.20 1131.18 Standard
deviation6.93 17.28 43.64 7.99 18.81 60.41 C V (%) 5.80 4.43 3.99 6.57 5.34 5.34 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8) 91-105 97 EDTA plasma (n=8) 89-102 95 Cell culture media (n=8) 91-108 99 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5) EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%) 90-106 94-107 89-104 Average (%) 97 99 96 1:4 Range (%) 90-104 86-96 83-95 Average (%) 97 91 89 1:8 Range (%) 89-102 79-93 89-104 Average (%) 94 86 95 1:16 Range (%) 87-99 88-99 86-99 Average (%) 92 93 91 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱 英文名稱 規格 保存條件 ELISA酶標板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃，可存放6個月 凍干標準品 Reference Standard 2 支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光)，可存放6個月 標準品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產品說明書 Product Description 1 份 質檢報告 Certificate of Analysis 1 份 說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染。
試劑體積以實際發貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。試驗所需自備物品
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1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
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2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
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3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
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4. 吸水紙
操作步驟
1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘 
2. 棄掉板內液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘 
3. 棄掉板內液體，洗板3次 
4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次 
5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 
6. 每孔加入50μL終止液 
7. 立即在450nm波長下讀數，處理數據
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