本公司產(chǎn)品僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
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研究領(lǐng)域公司擁有成熟的分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、蛋白表達(dá)純化技術(shù)、抗體篩選及制備等生物學(xué)技術(shù)。
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技術(shù)與服務(wù)公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù)體系受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。
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- 產(chǎn)品對比
- 產(chǎn)品描述
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- 商品名稱: Human HMGB-1(Highmobility group protein B1) ELISA Kit
- 商品編號: E-EL-H1554c
- 中文名: 人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
- 別稱: HMGB1, HMG1, HMG3, SBP-1, Amphoterin
- 適應(yīng)種屬: 人
- 檢測范圍: 31.25~2000 pg/mL
- 靈敏度: 18.75 pg/mL
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中HMGB-1濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人HMGB-1抗體包被于酶標(biāo)板上，實驗時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人HMGB-1會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人HMGB-1抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗人HMGB-1抗體與結(jié)合在包被抗體上的人HMGB-1結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，HMGB-1濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中HMGB-1的濃度。
反應(yīng)類型 夾心法 規(guī)格 96T 反應(yīng)時間 3.5h 反應(yīng)性 Human 檢測方法 Colormetric 檢測范圍 31.25—2000 pg/mL 靈敏度 18.75 pg/mL 樣本體積 100μL 樣本類型 血清，血漿或其他生物體液 特異性
可檢測樣本中的人HMGB-1，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(pg/mL) O.D
Average Corrected 2000 2.443
2.4472.445 2.374 1000 1.718
1.7641.741 1.67 500 0.988
0.9840.986 0.915 250 0.466
0.4980.482 0.411 125 0.265
0.2470.256 0.185 62.5 0.187
0.1610.174 0.103 31.25 0.118
0.130.124 0.053 0 0.069
0.0730.070 -- 
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。Intra-assay Precision
Inter-assay Precision Sample 1
2 3 1 2 3 n 20
20 20 20 20 20 Mean
(pg/mL)99.32
202.75 693.26 108.96 208.03 746.59 Standard
deviation5.84
8.62 35.56 5.86 9.76 26.06 C V (%) 5.88
4.25 5.13 5.38 4.69 3.49 回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type
Range (%) Average Recovery (%) Serum (n=8)
94-108 100 EDTA plasma (n=8)
94-107 100 Cell culture media (n=8)
93-105 99 線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
Serum (n=5)
EDTA plasma (n=5) Cell culture media (n=5) 1:2 Range (%)
98-111 92-105 85-100 Average (%) 105 98 92 1:4 Range (%) 90-103 84-100 88-102 Average (%) 98 91 94 1:8 Range (%) 87-99 83-93 85-96 Average (%) 94 88 90 1:16 Range (%) 88-103 85-96 86-99 Average (%) 94 90 91 試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
中文名稱
英文名稱 規(guī)格 保存條件 ELISA酶標(biāo)板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8 孔×12 條 -20℃，可存放6個月 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 Reference Standard 2 支 濃縮生物素化抗體(100×) Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120 μL 濃縮HRP酶結(jié)合物(100×) Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL -20℃(避光)，可存放6個月 標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20 mL 2-8℃.可存放6個月 生物素化抗體稀釋液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1瓶 14 mL 酶結(jié)合物稀釋液 HRP Conjugate Diluent 1瓶 14 mL 濃縮洗滌液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30 mL 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1瓶 10 mL 2-8℃(避光) 反應(yīng)終止液 Stop Solution 1瓶 10 mL 2-8℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5 張 產(chǎn)品說明書 Product Description 1 份 質(zhì)檢報告 Certificate of Analysis 1 份 說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準(zhǔn)。相關(guān)試劑在分裝時會比標(biāo)簽上標(biāo)明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。試驗所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙操作步驟
1. 對應(yīng)板孔中加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本后，立即每孔加入50μL生物素化抗體工作液，37℃孵育45分鐘
2. 棄掉板內(nèi)液體，洗板3次
3. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內(nèi)液體，洗板5次
4. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右
5. 每孔加入50μL終止液
6. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù)
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